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DNA 抽出用の標本

吉澤和徳（北大・農・昆虫体系）

2006.6.12

用途：シーケンス解析

• エタノールで問題なし：深津さんが書いているように，アセトンがベストのようですが，個人的にはアセトンはより揮発性が高く，標本が干上がる可能性が高そうなことと，あまりにおいが好きではないので，エタノールを使っています．
• 液の入れ替えが重要：採集直後は，虫から出て来た体液でアルコールが薄まったり酸化しやすくなったりします．採集から帰って来たらすぐに液を一回入れ替え，さらになるべく早くソーティングを行うことで，もう一回液を入れ替える事により，劣化がかなり防げます．これをやらないと，99% エタノールでも，標本の劣化が急速に進みます．
• 採集時は80%がベター：99% エタノールに入れた標本は，柔軟性が失われるので，チャタテムシのような軟弱な虫だと，触角や脚がすぐに折れてしまいます．特にフィールドでは標本に加わる振動も激しいので，80% で採集し，研究室で 99% にうつした方が，形態観察の利用には優れています．
• 80% 標本も以外と大丈夫：アルコールの劣化が進んでいなければ，80% エタノール標本も以外と大丈夫です．10年程度であれば，全く問題なく 1000bp くらい増やすことができます．20年前の標本からも上手く行った例があります．
• 乾燥標本も結構行ける：乾燥標本の場合，どれだけ素早く乾いたか，が重要です．酢酸エチルで殺した場合は，標本が長時間湿った状態におかれるので，あまり良くないようです．青酸カリがベストですが，危険なのであまり一般的には使えないでしょうね．乾燥標本から DNA を抽出する場合，脚などより速く乾燥する部位から抽出した方が良いようです．